通常选兔，也可选用大鼠。每组不少于3只。应设生理盐水对照或/和溶媒对照组，可采用同体左右侧自身对比法。根据受试物的特点和刺激性反映情况选择观察时间, 观察期结束时应对部分动物进行组织病理学检查。分别在左右两侧股四头肌内注射给药，观察给药后不同时间的局部反应，如充血、红肿等。给药后48～72小时剖检观察注射局部的刺激反应，按表1计算相应的反应级，并进行局部组织病理学检查，提供病理照片。

    根据表1计算肌肉刺激性总反应级，计算平均值，按表2判定刺激等级。若各股四头肌反应级的最高与最低之差大于2，应另取动物重新试验。

表1  肌肉刺激反应分级标准

表2  平均分值和等级